Dia 2

21/05

En este segundo día, el objetivo fue extraer macrófagos peritoneales de ratones de la cepa Balb/c. Para esto, preparamos medio de cultivo denominado F12 al 10 % de suero fetal bovino. Una vez sacrificado el ratón, se le inyecta 5ml del medio de cultivo en forma intraperitoneal (i.p.). Luego se extrae de nuevo el medio de cultivo recuperando suspensiones celulares que se dejaron adherir al plástico en placas de Petri durante 2 h. a 37°C. Una vez trascurrido ese tiempo se realizan dos lavados con PBS, las células adheridas (macrófagos) se trataron con lipopolisacárido de E. Coli en una concentración de 100 ug/ml durante 24 hs. Al otro día, se obtuvieron los sobrenadantes de cultivo y lisados celulares, de los cuales se dejo una alícuota para medir proteína por Bradford.
La imagen de arriba muestra los ratones utilizados mientras que la que se encuentra a continuación es un pequeño cuadro para entender un poco mejor lo recién explicado.